Sterilizzare con una pentola a pressione

Wikipedia dice: <<La sterilizzazione consiste in qualsiasi processo chimico o fisico che porti all'eliminazione di ogni forma microbica vivente, sia patogena che non, comprese le spore e i funghi. […]>> Wiki ovviamente continua con altre spiegazioni, ma a noi interessa solo questo.

La completa eliminazione di tutti i microrganismi presenti in un dato ambiente può essere ottenuta utilizzando calore, mezzi fisici (rimozione delle cellule), radiazioni o agenti chimici. Dato che la sterilizzazione prevede la distruzione di tutti i microrganismi presenti, una volta che un prodotto è stato sterilizzato e correttamente sigillato, rimarrà sterile indefinitamente. Detto questo occorre capire come poter realizzare un processo di sterilizzazione nel nostro laboratorio casalingo. Ovviamente non ci potremmo permettere di comperare un’autoclave super professionale, quindi dovremo adoperarci per rimedi più economici.

L’autoclave (vapore sotto pressione or pentola a pressione), sterilizza a 121°C per 15 minuti. Buono per sterilizzare quasi ogni cosa, tranne le sostanze termolabili che verranno denaturate o distrutte.

L`autoclave, uno strumento estremamente importante nella pratica microbiologica, assicura l'uccisione dei microrganismi, incluse le endospore, mediante l'utilizzazione di calore umido.  La sterilizzazione mediante calore prevede un trattamento che provoca la completa distruzione di tutti gli organismi e poiché le endospore sono praticamente ubiquitarie, le procedure di sterilizzazione vengono opportunamente programmate per la loro eliminazione. Per ottenere questi risultati è necessario raggiungere temperature superiori al punto di ebollizione dell'acqua, e ciò viene ottenuto immettendo vapore saturo sotto pressione nella camera a chiusura ermetica dell'autoclave. Il principio è quello sfruttato dalle normali pentole a pressione, che infatti possono venire utilizzate con risultati soddisfacenti per sterilizzare piccole quantità di materiale. La pressione usualmente utilizzata per la sterilizzazione in autoclave è di l.1 kg/cm2 (corrispondente a 1 atm di sovrapressione), che permette di raggiungere una temperatura di 121ºC; a questa temperatura il tempo di trattamento è generalmente di 10‑15 minuti. E` necessario sottolineare che non è la pressione che si raggiunge all'interno dell'autoclave che provoca la morte dei microrganismi; il fattore letale è, infatti, l'elevata temperatura che si può raggiungere a pressioni superiori a quella atmosferica Il vapore è il vettore del calore.

Montaggio lampada

Dunque con questo post la cappa è praticamente ultimata, manca soltanto la plafoniera a LED per illuminare l'area di lavoro. Come avete visto con pochissima spesa e pochissimo tempo abbiamo realizzato una cappa molto più semplice e versatile della precedente. In questa cappa non si ha flusso laminare a differenza della precedente, ma credo che con un buon grado di profilassi si possa comunque ottenere un discreto livello di purezza. Il prossimo passo sarà quello di inserire la plafoniera a LED, dopo di che potremmo iniziare ad ordinare il materiale per il sub strato.

Plafoniera fai da te

Terminata la lampada ed il relativo circuito, occorre schermare i pericolosi raggi UVC che potrebbero causarci danni agli occhi ed alla pelle. A questo scopo ho ideato una semplice plafoniera di plastica rivestita con della comunissima carta di alluminio. Il tutto a bassissimo costo e realizzato in pochi minuti. Buona visione.

Lampada a raggi UVC

Ben ritrovati sulle pagine del blog di Micropropagazione.blogspot.com.  Lo scorso giovedì vi ho mostrato la nuova lampada a raggi UV-C che useremo come abbattitore di ogni sostanza che potrebbe contaminare il nostro lavoro sotto cappa. Con questo post vi illustrerò come effettuare dei semplici collegamenti per rendere efficiente il nostro sistema a raggi UV-C. Se volete approfondire l’argomento vi ricordo di visitare questo articolo http://micropropagazione.blogspot.com/2010/10/circuito-lampada-germicida.html in cui viene spiegata la funzione di ogni singolo componente, necessario per il circuito e il relativo schema elettrico che ho riportato anche in questo post. Se invece volete un approfondimento sull’utilizzo dei raggi UV-C visitate questo articolo http://micropropagazione.blogspot.com/2010/10/lampada-germicida-uv-c.html.

Micropropagazione del Carciofo

Tra le tecniche di propagazione del carciofo la coltura in vitro mira all’ottenimento di materiale esente da fitopatie, in particolare funghi, batteri e virus e al raggiungimento di tassi di moltiplicazione più elevati rispetto a quelli ottenibili con i metodi tradizionali. La coltura in vitro viene condotta in condizioni asettiche e con l’impiego di celle climatiche con parametri ambientali controllati: fotoperiodo di 16 ore di luce e 8 di buio, illuminazione di 4000 lux e temperatura di 22 ± 1 °C. Il materiale di partenza è costituito da apici vegetativi di carducci dai quali viene prelevato l’apice meristematico, delle dimensioni di circa 0.5 mm. Le dimensioni dell’espianto sono di notevole rilevanza ai fini del risanamento poiché il successo della tecnica è basato sull’utilizzo di porzioni di pianta dove la probabilità di presenza dei virus è minima. Gli apici meristematici vengono posti in vitro e, attraverso una serie di passaggi su substrati differenti per il tipo di ormoni, si arriva alla rigenerazione di piantine complete.

Vantaggi: alti tassi di moltiplicazione di piante virus esenti

Svantaggi: Le plantule risultano, nella fase di accrescimento, più sensibili ad attacchi virali rispetto al materiale di norma utilizzato per la propagazione. Inoltre, nelle cultivar precoci tale importante caratteristica non viene più esaltata.

Lampada a raggi UV-C

Con questo video riprende il lavoro per la costruzione di nuove cappe  per i nostri esperimenti sulla micropropagazione dei tessuti vegetali. Oggi vi presento un nuovo modello di lampada a raggi UVC utilizzata come abbattitore di sostane patogene. A differenza della vecchia lampada utilizzata nel primo progetto questa una lampada ad incandescenza e che quindi non necessita di reattori e starter. Comunque nei prossimi giorni  vi farò sapere meglio dopo aver effettuato il collaudo.

Bioreattore al carciofo

Eccomi di nuovo tra voi dopo una lunga assenza dovuta al nuovo lavoro e alla lontananza da casa. Prima di lasciare il 2011 volevo salutare tutti voi augurandovi un felice anno nuovo, scusandomi  per non aver trovato il tempo per aggiornare costantemente il blog. Colgo anche l’occasione per salutare tutti gli amici che in questi mesi mi hanno scritto per avere consigli, informazioni e spiegazioni sul processo micropropagativo (mi raccomando continuate a scrivermi), dandomi la spinta per continuare ad aggiornare le pagine di questo blog. In molte delle vostre mail ho percepito la volontà di fare di questa passione una professione, cosa lodevole e che condivido in pieno ma che spesso e volentieri risulta essere ardua e faticosa. Mi riferisco in particolare a noi neo-laureati che pieni di entusiasmo e passione ci scontriamo contro un mercato del lavoro morto, il quale non ci da il giusto credito propinandoci umilianti contratti da stagisti senza essere mai convertiti in contratti di lavoro. Data la mia scarsa esperienza in questo campo, non mi sento certo di dispensare consigli, ma se volete davvero lavorare in questo settore, fate affidamento solo sulle vostre capacità e su quelle dei vostri colleghi neo-laureati. Non aspettate che qualcuno vi illuda con false promesse (vedi il caso del bireattore al carciofo) e non fatevi prendere in giro dai ridicoli contratti da stagista per poi ritrovarvi a fare tutt’altro. Come ho detto a molti di voi se qualcuno ha davvero voglia di mettere su un laboratorio di micropropagazione non tardate a chiamarmi, io sarò dei vostri.

Buon 2012

Davide