Vite (Vitis vinifera L.) è una delle colture da frutto più coltivato nel mondo. Il classico miglioramento genetico delle cultivar, al fine di ottenere vini di alta qualità e varietà di uva da tavola, con i metodi convenzionali di ibridazione, non sembra essere un approccio pratico; pertanto sono stati proposti metodi non convenzionali. Un prerequisito per sviluppare tali approcci per la vite, è la capacità di effettuare efficaci tecniche di rigenerazione "in vitro. La micropropagazione rappresenta un efficiente metodo di rigenerazione delle piante e permette una rapida propagazione attraverso l'organogenesi ed embriogenesi . Ecco quindi di seguito un interessante protocollo per micropropagare la Vite adottato in Romania e testato dall'Universita di Bucarest.
Materiali e metodi Piante: tagli ottenuti da vitigni con 10-15 anni di età, appartenenti alle cultivar di uva "Soltanin" e "Sahebi" , poste in serra per registrare un allungamento di 10 cm e i germogli sono stati utilizzati come fonti di espianto. I segmenti di germogli con gemme apicali e ascellari vengono disinfettati per 15 minuti, agitando continuamente in candeggina al 5%, dopo di che le gemme sono state sezionate per rimuovere tutte le foglie estranee ad eccezione del picciolo.
Morfogenetica e stabilizzazione: i germogli sono stati trasferiti al mezzo culturale di iniziazione, composto da:
- · 30 g/L saccarosio,
- · 6 g/L agar,
- · con quattro tipi di ormoni:
o 1mg/LBA (6-benzilaminopurina)],
o 1.5 mg/L BA,
o 1 m/gL IBA (acido indolo-3-butirrico)
o 1 mg/L TDZ (thidiazuron]
Dopo 3/4 settimane, per una migliore proliferazione, le colture sono state trasferite in terreni di coltura freschi per un ulteriore allungamento dei germogli. Dopo di che si trasferiscono i germogli su di un substrato MS integrato con 1mg/L TDZ + 1.5mg/L GA3 (Acido gibberellico). Infine, i germogli sono stati tolti e trasferiti ai media radicamento.
Fase radicazione: I germogli ottenuti dai terreni di coltura sono stati testati per la capacità radicazione. Per sradicare "in vitro" i germogli sono stati coltivati in terreno MS integrato con 0.5mg/L NAA (α - acido naftalene acetico). Dopo di che le piantine sviluppatisi in vitro sono state acclimatate in ambiente controllato, in particolari condizioni di elevata umidità relativa. Infine le piantine sono state asportate e pretrattate con 1mg/L IBA, e poste direttamente in vaso coperti con un telo di plastica per simulare l’effetto serra all'interno e con effetto di nebulizzazione per 4 settimane. In seguito, le piantine radicate sono state trasferite in serra senza coperchio di plastica e senza sistema di nebulizzazione.
Nessun commento:
Posta un commento